產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
吖啶橙(Acridine Orange, AO) 屬于三環(huán)雜芳香燃料情況正常,可以標(biāo)記DNA相互配合、RNA,屬于異染性熒光染料指導。該染料具有膜通透性競爭力,能透過(guò)細(xì)胞膜,使核DNA和RNA染色資料。因此AO常用于細(xì)胞內(nèi)DNA和RNA進(jìn)行檢測(cè)廣泛應用。AO不核酸結(jié)合方式主要有:1、插入性結(jié)合橫向協同,AO嵌入核酸雙鏈的堿基對(duì)之間哪些領域,這種結(jié)合方式主要為AO與 DNA的結(jié)合,其熒光發(fā)射峰為530nm不斷創新,激發(fā)后呈綠色熒光建立和完善;2、靜電吸引堅持先行,帶正電荷的AO與單鏈核酸的磷酸根(帶負(fù)電荷)產(chǎn)生靜電間的吸引結(jié)合產業,這種結(jié)合方式主要為AO與RNA的結(jié)合,其熒光發(fā)射峰為640nm情況較常見,激發(fā)后呈紅色熒光可持續,少量結(jié)合會(huì)呈桔黃色或桔紅色熒光。因此體製,吖啶橙嵌合到雙鏈DNA分子中顯綠色構建,與DNA單鏈或RNA結(jié)合時(shí)發(fā)桔黃色或橙紅色熒光。
NobleRyder吖啶橙染色液(1mg/ml)為儲(chǔ)存液服務延伸,使用時(shí)應(yīng)稀釋到合適濃度后使用共創輝煌。染色后在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過(guò)正常細(xì)胞膜進一步,使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光大部分;而在凋亡細(xì)胞中,因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷實際需求,形成凋亡小體解決方案。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光或黃綠色碎片顆粒;而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失善謀新篇。吖啶橙染色常與EB染色合用雙染增產,因EB只染死細(xì)胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞行動力。
產(chǎn)品組成:
名稱/編號(hào) | D0836 | Storage |
10ml | 4℃ 避光 | |
使用說(shuō)明書 | 1份 |
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自備材料:
1提供有力支撐、熒光顯微鏡
2、低速離心機(jī)
3保供、PBS
4自行開發、細(xì)胞計(jì)數(shù)板
5、載玻片單產提升、蓋玻片
操作步驟(僅供參考):
1傳遞、收集細(xì)胞(采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),應(yīng)先固定細(xì)胞)勞動精神,用PBS清洗細(xì)胞1次開展攻關合作,計(jì)數(shù)并調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度至106/ml。
2預下達、取適量的細(xì)胞懸液的有效手段,加入Acridine Orange Stain(1mg/ml),使AO終濃度為8.5~17μg/ml方案,輕輕混勻關鍵技術。
3、室溫避光染色15~20min深入,滴加于載玻片上并加蓋玻片或上流式細(xì)胞儀分析技術研究。
4、熒光顯微鏡下觀察(激發(fā)濾光片波長(zhǎng)488nm開展研究,阻斷濾光片波長(zhǎng)515nm)姿勢,計(jì)數(shù)并拍照。
染色結(jié)果:
正常細(xì)胞 | 細(xì)胞被均勻染成黃綠色熒光 |
凋亡細(xì)胞 | 染色質(zhì)濃縮首要任務,細(xì)胞核碎裂成點(diǎn)狀綠色化,被 染成大小不一、致密濃染的綠色顆粒 |
注意事項(xiàng):
1發展、Acridine Orange Stain(1mg/ml)不含破膜劑保持穩定,較少單獨(dú)使用。
2面向、吖啶橙染色常與EB染色合用支撐作用,可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞建設項目。
3規模、如有低溫離心機(jī)進(jìn)行離心效果更佳。
4講道理、操作過(guò)程中應(yīng)注意減少試劑暴露于強(qiáng)光下的時(shí)間。
5、試劑有一定毒性更多的合作機會,請(qǐng)小心操作延伸。
6、為了您的安全和健康有效保障,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作大數據。
有效期:6個(gè)月有效。