產(chǎn)品簡介:
堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase製造業,簡稱ALP或AKP)為一類磷酸酯酶,廣泛分布于哺乳動物組織內(nèi)關規定,其活性所需zui適pH9.2~9.8發展基礎。此酶主要存在于物質(zhì)交換活躍之處(細胞膜),如腸上皮和腎近曲小管的刷狀緣建強保護、附睪上皮之靜纖毛顯示、肝的毛細膽管膜以及微動脈和毛細血管動脈部之內(nèi)皮創新為先,還見于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基復合體科普活動、吞飲小泡創新延展、腸上皮之溶酶體、中性粒細胞之中性顆粒以及平滑肌之細胞膜長期間。
堿性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)不是采用金屬沉淀法來顯示堿性磷酸酶活性基本情況,而是采用偶氮偶聯(lián)法(又稱同時偶聯(lián)法)合理需求,其原理是在pH9.2~9.8的堿性條件下記得牢,細胞內(nèi)堿性磷酸酶可使AB-BI磷酸鹽水解,釋放出磷酸不萘酚講故事,后者與偶聯(lián)重氮鹽生成有產(chǎn)物不負眾望,定位于細胞質(zhì)中高效流通。該染液可用于血液、骨髓或細胞涂片精準調控、冰凍切片功能、梯度入水后的石蠟切片等的堿性磷酸酶染色,堿性磷酸酶活性部位呈藍色,位于胞槳解決,結果較金屬鹽沉淀法可靠預期。
產(chǎn)品組成:
編號 名稱 | D2804 4×2ml | D2804 4×10ml | D2804 4×20ml | Storage | |
試劑(A):ALP固定液 | 2ml | 10ml | 20ml | RT避光 | |
試劑(B): ALP孵育液 | B1:AS-BI染色液 | 1ml | 5ml | 10ml | -20℃避光 |
B2:FBB染色液 | 1ml | 5ml | 10ml | -20℃避光 | |
臨用前,按 B1:B2=1:1 比例混合幅度,即為 ALP 孵育液結構,即配即用。 | |||||
試劑(C):核固紅染色液 | 2ml | 10ml | 20ml | 4℃避光 | |
試劑(D):甲基綠染色液 | 2ml | 10ml | 20ml | RT避光 | |
使用說明書 | 1份 |
自備材料:
1貢獻、載玻片規模最大、濕盒
2、顯微鏡
操作步驟(僅供參考):
(一)統籌、涂片或切片
1最深厚的底氣、血液、骨髓或細胞涂片堅實基礎、冰凍切片、石蠟切片入ALP固定液固定3min(梯度入水后的石蠟切片無需固定)重要作用,水洗等地。
2、滴加配制好的ALP孵育液尤為突出,放入濕盒中規定,避光孵育15~20min,水洗空間載體。
3高質量、入核固紅染色液或甲基綠染色液復染3~5min相對簡便。
4、水洗流程、鏡檢或甘油明膠封固后鏡檢合作。
(二)貼壁培養(yǎng)細胞
1、取6孔板或其他容器培養(yǎng)的細胞深刻變革,棄液結論,PBS清洗干凈。
2質生產力、加入ALP固定液固定3min或4%多聚甲醛固定10~15min適應性強,PBS清洗。
3先進的解決方案、滴加配制好的ALP孵育液拓展,放入濕盒中,避光孵育15~20min宣講活動,PBS清洗不斷進步。
4、入核固紅染色液或甲基綠染色液復染3~5min確定性。
5更加廣闊、PBS 清洗、鏡檢講故事。
染色結果:
ALP活性部位 | 藍色 |
細胞核 | 紅色(核固紅)或綠色(甲基綠) |
血液非常完善、骨髓涂片結果判斷:
一般以積分報告結果,根據(jù) 100 個中性粒細胞陽性顆粒進行 0~4+計分全面革新。
細胞分值 | 染色特點 |
0 | 無顆粒 |
1 | 稍有顆粒 |
2 | 中等程度顆粒 |
3 | 多數(shù)顆粒 |
4 | 充滿顆粒 |
臨床意義:
1作用、類白血病反應積分明顯增高,未經(jīng)治療的慢性粒細胞白血病積分明顯減低行業分類。
2技術特點、急性細菌感染積分明顯增高,病毒感染積分多正嘲l展邏輯;驕p低凝聚力量。
3、再生障礙性貧血積分常增高聽得進,PNH新的力量、MDS積分常減低。
注意事項:
1便利性、血液或骨髓細胞涂片或其他樣本均應新鮮全面展示,薄厚適宜,及時固定,否則會影響酶的活性共同學習。
2順滑地配合、培養(yǎng)細胞染色操作過程中,清洗效高、染色等步驟都應輕微前沿技術,以免損傷或丟失細胞。
3高效節能、ALP孵育液易失效或降低陽性強度影響力範圍,即配即用,不宜久置新創新即將到來。
4邁出了重要的一步、復染時,核固紅染色液或甲基綠染色液二者取其一設施。
5需求、每次染色時,應有陽性對照片組合運用。
有效期:6個月有效更讓我明白了。