看完本篇你就知道該如何使用MPbio土壤提取試劑了
更新時(shí)間:2021-10-13 點(diǎn)擊次數(shù):1529次
MPbio土壤提取試劑可在30分鐘之內(nèi)設計能力,快速持續發展、有效地從土壤以及其他環(huán)境樣品中提取基因組DNA過程中。適用于從土壤中的所有生物包括G+細(xì)菌提單產、酵母菌深入實施、真菌、藻類發展空間、線蟲類甚至真細(xì)菌的孢子效果、芽孢中提取基因組DNA。
而且它還可以提取其他環(huán)境樣品的DNA足了準備,如沉積物快速融入、排泄物、廢水系統、雪水等增強。只需500mg的樣品即可得到足夠的DNA。
實(shí)驗(yàn)原理為用特殊的裂解介質(zhì)E處理樣品交流等,之后使用自旋過濾器基于硅吸附DNA原理的GENECLEAN?步驟進(jìn)行純化更加廣闊,得到的DNA可用于PCR、限制性酶切提高、電泳及其他下游實(shí)驗(yàn)可以使用。
很多用戶對(duì)于MPbio土壤提取試劑的提取方法不是很清楚,特別是對(duì)于沒有儀器的情況下紮實,更是感到無從下手效高化。
為了解決用戶的煩惱,特整理了MPbio土壤提取試劑的提取方法投入力度,分享給大家最為顯著,只需按照步驟操作,即使沒有儀器的情況下規定,也可以快速提取土壤DNA!
1環境、稱取0.3g~0.4g樣品加入LysingMatrixETube中。(注意:需保證加完樣品及所需溶液后高質量,管中應(yīng)留出不少于200μL空間)
2相對簡便、加入978μLSPB,加入122μLMTBuffer流程。
3合作、蓋緊LysingMatrixETube的蓋子,將離心管置于渦旋混合儀上助力各業,對(duì)管內(nèi)物質(zhì)進(jìn)行震蕩破碎均質(zhì)化極致用戶體驗,時(shí)間設(shè)定為40s~50s。(注意:時(shí)間不可過長深入交流,有可能打斷基因組DNA片段降低提取質(zhì)量)從各個(gè)角度都可以震蕩一下引領作用,不要光是底部加強宣傳。
4、在8000r/min轉(zhuǎn)速下離心15min用的舒心,有利于去除體積較大或具有復(fù)雜細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的樣品碎屑技術發展。
5、將上清液用大口槍頭吸出轉(zhuǎn)入1.5mL的微離心管中集成,加入250μLPPS重要手段,手持離心管晃動(dòng)10次以混勻。
6穩定性、在8000r/min下離心5min像一棵樹,用大口槍頭將上清液轉(zhuǎn)移至5mL離心管中。
7去突破、搖勻BindingMatrix后能運用,吸取1.0mL加入上一步離心管中。
8智能設備、將離心管上下顛倒2min后不可缺少,靜置3min,使DNA附著于BingdingMatrix上特點,并等待二氧化硅基質(zhì)沉淀積極回應。(這一步根據(jù)沉淀情況時(shí)間可以適當(dāng)延長)
10、將剩余的上清液與沉淀物重新混勻凝聚力量,吸取約600μL混合液移入SPINFilter中有所提升,8000r/min下離心1min。
11新的力量、倒掉收集管中的液體先進水平,重復(fù)上一步操作直至5mL離心管中的液體吸盡。
12去創新、加入已制備好的SEWS-M溶液500μL足夠的實力,用小槍頭小心混勻后緊迫性,8000r/min下離心1min后結構,棄去收集管中的液體。
13高效、為更好的去除雜離子溝通協調,重復(fù)第12步,更換為1.5mL離心管體系。
14保障性、在8000r/min下離心2min,去除殘留的SEWS-M溶液責任製,然后更換為干凈的1.5mL離心管十分落實。(若發(fā)現(xiàn)殘余溶液較多倍增效應,可重復(fù)此步驟)
15、在室溫下製造業,將SPINFilter風(fēng)干5min優化服務策略。(時(shí)間可以更久一些)
16、往SPINFilter加入80μLDES溶液發展基礎,用小槍頭小心使之與BindingMatrix混勻兩個角度入手,65℃水浴15min(有利于DNA的溶出)。8000r/min下離心2min同期,可得到約50μL的DNA溶液生產效率。再加入80μLDES溶液重復(fù)第16步操作,一共可得到約100μL的DNA溶液效果。
17使用、棄去SPINFilter,將提取好的DNA存于-20℃冰箱保存密度增加。