DNA退火緩沖液
本Annealing Buffer可以用于DNA oligo退火提升，不可用于RNA oligo 的退火更高效。退火后產(chǎn)物可以直接和經(jīng)酶切、純化的質(zhì)粒連接。通常轉(zhuǎn)化后可以得到大量的陽性克隆。
DNA退火緩沖液
D0110 DNA退火緩沖液 NobleRyder 5ml 80.00
本公司供應(yīng)化學(xué)試劑的DNA退火緩沖液長效機製，*，歡迎洽談數字技術。
簡介：本Annealing Buffer可以用于DNA oligo退火製高點項目，不可用于RNA oligo 的退火。退火后產(chǎn)物可以直接和經(jīng)酶切範圍和領域、純化的質(zhì)粒連接。通常轉(zhuǎn)化后可以得到大量的陽性克隆各項要求。
保存條件：
-20℃保存更高要求，一年有效。
操作步驟
1. 把要退火的DNA oligo用經(jīng)滅菌的三蒸水配制成50μM新技術。解凍Annealing Buffer for DNA Oligos（5X）共同學習，混勻備用。如經(jīng)常使用深入，本Buffer可放置2-8℃一個月效高。
2. 如下設(shè)置退火反應(yīng)體系：
Annealing Buffer for DNA Oligos（5X） | 20μl |
DNA oligo A（50μM） | 20μl |
DNA oligo B（50μM） | 20μl |
Nuclease-Free Water | 40μl |
總體積 | 100μl |
按照上述順序依次加入各種試劑，混勻基礎。放入PCR儀性能。
3. 如下設(shè)置PCR儀進(jìn)行退火反應(yīng)：
步驟 | 溫度 | 時間 | 說明 |
1 | 95℃ | 2分鐘 | 讓oligo充分變性 |
2 | 每8秒下降0.1℃，降至25℃（注1） | 約90分鐘 | 退火 |
3 | 4℃ | 長時間保持 | 暫時存放 |
注1：如果所用的PCR儀不具備下降0.1℃的功能對外開放，也可以設(shè)置為每90秒下降1℃技術創新。
4. 退火結(jié)束后可以直接用于連接反應(yīng)，也可以在-20℃凍存?zhèn)溆觅Y料。如果退火結(jié)束后打算進(jìn)行酶切等其它反應(yīng)廣泛應用，用純化試劑盒進(jìn)行純化，或者確保退火產(chǎn)物在反應(yīng)體系中體積不超過10%橫向協同，以避免AnnealingBuffer對后續(xù)的酶反應(yīng)體系的干擾哪些領域。
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 品牌 | 規(guī)格 | 價格（元） |
D0963 | 2×Pfu PCR MasterMix （不含染料） | NobleRyder | 1ml/10ml | 160.00/1200.00 |
D0962 | 2×Pfu PCR MasterMix （含染料） | NobleRyder | 1ml/10ml | 160.00/1200.00 |
D0961 | 2×Taq PCR MasterMix （不含染料） | NobleRyder | 1ml/10ml | 80.00/580.00 |
D0960 | 2×Taq PCR MasterMix（含染料） | NobleRyder | 1ml/10ml | 80.00/580.00 |
D0965 | 2×Taq Plus PCR MasterMix （不含染料） | NobleRyder | 1ml/10ml | 120.00/1000.00 |
D0964 | 2×Taq Plus PCR MasterMix （含染料） | NobleRyder | 1ml/10ml | 120.00/1000.00 |
D0110 | DNA退火緩沖液 | NobleRyder | 5ml | 80.00 |
D0973 | dNTP（10mM） | NobleRyder | 1ml | 80.00 |
D0974 | dNTP（2.5mM） | NobleRyder | 1ml | 40.00 |
D0951 | Pfu DNA Polymerase | NobleRyder | 500U/2500U | 180.00/720.00 |
D0033 | SYBR Green I（20×）定量PCR用 | NobleRyder | 1ml | 120.00 |
R0928 | SYBR Green II（10000×） | NobleRyder | 100ul | 520.00 |
D0950 | Taq DNA Polymerase | NobleRyder | 1000U/5000U | 80.00/320.00 |
D0952 | Taq Plus DNA Polymerase | NobleRyder | 500U/2500U | 140.00/560.00 |
