1.適用范圍：適合于大量中性福爾馬林固定著力提升、石蠟包埋組織切片的抗原修復深刻內涵，其效果優(yōu)于微波修復法和直接煮沸修復法,使得免疫組化結果更加可靠；推薦使用本法. 2.儀器設備：市售不銹鋼家用壓力鍋（以不銹鋼制品為好）融合，大小尺寸可根據(jù)需要而定（內(nèi)徑18cm為好）深入闡釋；1000-1500W電爐一臺；不銹鋼或耐高溫塑料切片架完成的事情。 3.所需試劑：0.01M檸檬酸型緩沖液物聯與互聯，pH=6.0±0.1 4.操作步驟： （1）常規(guī)組織切片經(jīng)二甲苯脫蠟、梯度酒精水化后改造層面，浸泡于蒸餾水中待用供給。 （2）取一定量pH=6.0檸檬酸鹽緩沖液（800-1500ml）于壓力鍋中，大火加熱直至沸騰經驗分享；將脫蠟水化后的組織切片置于不銹鋼或耐高溫塑料切片架上解決方案，放入已沸騰的緩沖液中。蓋上鍋蓋有力扭轉，扣上壓力閥上高質量，繼續(xù)加熱至噴汽，從噴汽開始計時廣度和深度，1-2分鐘后攻堅克難，壓力鍋離開熱源，冷卻至室溫（稍冷后顯示，可在自來水籠頭下加速冷卻），取出玻片效率和安，先用蒸餾水沖洗兩次設計能力，之后用PBS（pH=7.2-7.4）沖洗兩次，每次3分鐘（2×3'）深入開展。 （3）按公司有關試劑盒的操作步驟執(zhí)行更為一致。 5.注意事項： （1）加熱時間長短的控制很重要，從組織切片放入緩沖液到高壓鍋離開火源的總時間控制在5-8分鐘為好技術的開發，時間過長可能會使染色背景加深研究與應用。 （2）必須使用不銹鋼或耐高溫塑料切片架，不能使用銅架更高效，以防緩沖液pH值增高而導致掉片全面協議。 （3）高壓鍋離開火源后必須等緩沖液冷切后，才能把切片取出緊密協作。 （4）為防止組織脫落越來越重要，玻片必須經(jīng)清潔處理后，涂覆Poly-L-Lysine
（5）緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到發揮重要作用，用過的檸檬酸緩沖液不能反復使用醒悟。 常用的消化酶為胰蛋白酶和胃蛋白酶。一般說來，胰蛋白酶消化能力較胃蛋白酶弱也逐步提升，主要用于細胞內(nèi)抗原的消化記得牢，胃蛋白酶主要用于細胞間抗原的消化。工作中要認真參照抗體說明書指示進行消化酶的選擇重要的作用，這樣針對性更強更多可能性，標記效果更理想。 問：為什么要進行抗原修復： 答：福爾馬林固定時積極回應，組織中的許多氨基酸殘基在分子內(nèi)或分子間形成了醛鍵重要性，使得不少抗原決定簇被封閉。同時多種場景，由于甲醛的聚合作用多元化服務體系，使蛋白質(zhì)分子間相互交聯(lián)形成大分子網(wǎng)絡，也導致了抗原決定簇被掩蓋擴大公共數據，這就使得相當部分的抗原不能與抗體很好是進行反應深度。因此，抗原修復也是影響免疫組化染色結果的基本因素核心技術體系。 抗原修復中檸檬酸緩沖液的配制方法： A液：枸櫞酸開拓創新，C6H8O7.H2O，21.01g 加水定容至1000ml必然趨勢； B液：枸櫞酸鈉促進善治，C6H5Na3O7.2H2O, 29.41g 加水定容至1000ml; 使用時： A液9 ml, B液41 ml，加水至500ml多樣性，即可配成工作液發揮效力。 抗原修復（Antigen retrieval ，AR）技術明顯，是指石蠟安全鏈、冰凍、火棉膠創新為先、塑料切片免疫組織化學（IHC）前用胰蛋白酶進一步完善、尿素、表面活性劑競爭力、微波緩沖液和金屬鹽等調整推進，使被掩蓋的抗原決定簇或變性的抗原重新暴露或抗原性得到一定程度的恢復過程蓚€角度入手？乖迯湍躾ui大程度地恢復在制片等過程中損失的抗原性建強保護，使原來認為不能在石蠟切片上進行IHC的許多抗體獲得了良好的染色結果，成為一種有效的補救措施生產效率。本文的目的是概述AR-HIC的發(fā)展使命責任、應用和標準化效果。 一 | 
