NobleRyder West Femto ECL化學發(fā)光底物
NobleRyder West Femto ECL化學發(fā)光底物 NobleRyder ECL化學發(fā)光底物 即用型液體試劑 P9900-2*12.5mLNobleRyder ECL化學發(fā)光底物 即用型液體試劑 P9900-2*50mL
NobleRyder West Femto ECL化學發(fā)光底物
產(chǎn)品介紹：
WestFemto 最高靈敏度底物是用于辣根過氧化物酶(HRP)的增強型化學發(fā)光底物
本產(chǎn)品特點：
1適應性、 靈敏—使用適當?shù)囊豢购投箷r供給，可在硝化纖維膜或 PVDF 膜上檢測豐度為飛克級的蛋白條帶
2、定量—所得信號的可定量檢測范圍跨越兩個數(shù)量級提高鍛煉。 • 明亮信號—通過膠片或成像系統(tǒng)進行曝光智能化，易于捕獲圖像。
3進一步完善、長信號持續(xù)時間—優(yōu)化條件下廣泛應用，可檢測的光信號輸出長達 8 小時。
4橫向協同、穩(wěn)定試劑—試劑盒組分能夠在 4°C 條件下穩(wěn)定放置一年哪些領域，在室溫下可穩(wěn)定放置6 個月。
5不斷創新、價格經(jīng)濟—配方經(jīng)過優(yōu)化建立和完善，可適用于濃度極低的抗體檢測。
6參與水平、1ng至0.2μg/mL 一抗（以1μg/mL 儲存液稀釋 1:5,000 至 1:100,000 倍）
7大型、 2ng至10ng/mL 二抗（以1μg/mL 儲存液稀釋 1:100,000 至 1:500,000 倍） 當 West Femto 底物與優(yōu)化的抗體濃度和封閉緩沖液配合使用時，可檢測到常規(guī) ECL 底物無法檢 測的低豐度靶標蛋白情況較常見。
使用方法：
注：優(yōu)化抗原和抗體的濃度可持續。必須使用建議的抗體稀釋度，以保證陽性結(jié)果體製。有關(guān)建議的稀釋度范 圍請參考其他所需材料構建。
1) 將一抗?jié)舛认♂尩?1ng 至 0.2μg/mL（以 1μg/mL 儲存液稀釋 1:5,000 至 1:100,000 倍） 2) 將二抗?jié)舛认♂尩?2ng 至 10ng/mL（以 1μg/mL 儲存液稀釋 1:100,000 至 1:500,000 倍） 3) 將兩種底物組份按 1:1 比例混合，制備底物工作液服務延伸。 注：暴漏于日光或任何其他強光可能損害工作液共創輝煌，為獲得優(yōu)良結(jié)果具有重要意義，將此工作液保存在琥珀色瓶中， 并避免長期暴漏于任何強光大部分。短時間暴漏于實驗室常規(guī)照明不會損害該工作液強大的功能。
4) 將印跡膜在 WestFemtoECL 底物工作液中孵育5分鐘。
5) 吸出多余試劑解決方案。用清潔的塑料膜蓋住該印跡膜優勢。
6) 使印跡膜在 X 光膠片上曝光。
蛋白印跡法詳細操作步驟
1) 將印記膜從蛋白轉(zhuǎn)印設(shè)備中取出增產，加入合適的封閉液在溫室下孵育 20-60 分鐘便利性，同時振蕩。以封閉膜上非特異性蛋白結(jié)合位點行動力。 請注意：使用在前文建議的抗體稀釋度是非常重要的提供有力支撐。
2) 將膜從封閉液中取出，與一抗工作液在溫室孵育 1 小時保供，同時振蕩自行開發；或在 28℃孵育過夜，不振蕩引領。
3) 將足量的洗滌緩沖液加至膜上自動化裝置，保證緩沖液將膜wan全覆蓋。振蕩孵育≥5 分鐘勞動精神，更換洗滌緩沖液 并重復該步驟 4-6 次開展攻關合作。增加洗滌緩沖液體積製度保障，洗滌次數(shù)和洗滌時間有助于降低背景信號預下達。 注：孵育前，膜在洗滌緩沖液中的短暫淋洗會提高洗滌效率統籌推進。 請注意：使用在前文建議的 HRP 標記二抗稀釋度是非常重要的方案。
4) 將 HRP 標記的二抗工作液與膜在溫室孵育1小時，同時振蕩了解情況。
5) 重復步驟3深入，以除去未結(jié)合的HRP 標記二抗。 注：膜與HRP標記二抗孵育后必須進行徹di洗滌重要的。
6) 將A溶液與B液等比例混合開展研究，制備成工作液。每cm2膜使用 0.01～0.1ml 工作液相互融合。工作液可以 在溫室下穩(wěn)定 8 小時首要任務。 注：暴漏雨日光或任何其他強光下可能損害工作液，為獲得嘴角結(jié)果不同需求，將此工作液保存在琥珀色瓶中發展，并避免長期暴漏雨任何強光保持穩定。實驗室的常見照明不會損害工作液。
7) 將印記膜在工作液中孵育5分鐘面向。
8) 從工作液中取出印記膜支撐作用，并置于一個塑料片或清潔的塑料紙（膜）中，用一張吸水紙吸除多余 的液體建設項目，并從印記和塑料紙之間小心地壓出氣泡最為突出。
9) 將包在塑料紙（膜）中的印記膜置于膠片暗盒中，蛋白質(zhì)面朝上相結合，除適用于膠片曝光的燈（如 紅色安全燈）之外發展目標奮鬥，關(guān)閉所有的燈。
注意：膠片必須在曝光期間保持干燥更多的合作機會，為獲得優(yōu)良效果延伸，采取以下措施：
* 確保將多余的底物從膜和塑料紙上wan全去除。
* 在整個膠片處理期間有效保障，使用手套大數據。
* 切莫將印記膜置于已顯影的膠片上，因為膠片上的化學物質(zhì)會減弱信號講實踐。
10) 將X光膠片置于膜的上面數字技術。建議第一次曝光 60 秒。之后可調(diào)整曝光時間以達到優(yōu)良結(jié)果市場開拓〈胧?；瘜W發(fā)光反應(yīng)在底物孵育后的前 5-30 分鐘期間是*強烈的。這一反應(yīng)可以持續(xù)幾個小時要落實好，但強度會隨時間下降緊密相關，如有底物孵育后較長時間后曝光，曝光時間可能需要延長以獲得較強信號先進技術。如果使用 磷光存儲成像設(shè)備（如Bio-Rad的分子成像儀系統(tǒng)）或CCD 照相機可能需要較長的曝光時間培訓。
注意：膠片與膜之間的任何移動可能在膠片上造成人為的非特異信號。 11) 使用合適的顯影劑和定影劑對膠片進行顯影宣講手段。如果信號太強重要工具，則縮短曝光時間或?qū)⒂∮浤みM行 剝離并降低抗體濃度重新檢測。
重要提示：
1配套設備、為獲得優(yōu)良效果更優質，必須優(yōu)化該系統(tǒng)的全部組分，包括樣品量推進高水平、一抗和二抗?jié)舛纫约澳ず头忾]試劑的類型脫穎而出。
2、使用該產(chǎn)品比使用沉淀比色 HRP 底物檢測所需的抗體濃度低資料。為優(yōu)化抗體濃度廣泛應用，請進行一次 系統(tǒng)的點印跡分析關註度。
3、沒有一種封閉試劑對所有系統(tǒng)而言都是優(yōu)良的哪些領域，所以為每一個免疫印跡檢測系統(tǒng)找到最合適的 封閉緩沖液非常必需敢於挑戰。封閉試劑有可能與抗體產(chǎn)生交叉反應(yīng)，導致出現(xiàn)非特異性信號建立和完善。封閉緩沖液 同時也會影響系統(tǒng)的靈敏性提供了遵循。當從一種底物轉(zhuǎn)換為另一種底物時，有時會出現(xiàn)信號衰減或背景增加 的現(xiàn)象大型，原因可能是封閉緩沖液不適合新的檢測系統(tǒng)基石之一。
4、使用親和素/生物su檢測系統(tǒng)時增持能力，避免使用牛奶作為封閉試劑共同努力，因為牛奶中含有不定量的內(nèi)源性生物su，會導致高背景信號追求卓越。
5逐漸完善、保證洗滌緩沖液、封閉緩沖液合理需求、抗體溶液和底物工作液的使用體積是目前主流，以確保在整個實驗過程中 印跡膜wan全被液體覆蓋，避免膜變干高質量。增大封閉緩沖液及洗滌緩沖液的使用量可以降低非特異性的 信號充分發揮。
6、為獲得優(yōu)良效果管理，在孵育步驟請使用搖床設計。
7、 將 Tween20(終濃度 0.05-0.1%)加入封閉緩沖液和稀釋的抗體溶液基礎，以降低非特異信號提供堅實支撐。使用高 品質(zhì)的產(chǎn)品，如去污劑高產。它保存在安瓿中，過氧化物和其他雜質(zhì)含量很低發揮作用。
8良好、不要使用疊氮鈉作為緩沖液的防腐劑。疊氮鈉是 HRP 的抑制物銘記囑托。
9引領、避免手與膜直接接觸，實驗過程應(yīng)戴手套或使用干凈的鑷子示範。
10應用前景、所有設(shè)備必須清潔且不沾染外來物質(zhì)有很大提升空間。金屬器械（如剪刀）不得具有可見的銹跡。銹跡可能導 致斑點形成和高背景首次。
11可能性更大、底物工作液在室溫下可穩(wěn)定8小時。日光或任何其他強光下可能損害底物搖籃，為獲得優(yōu)良結(jié)果共享應用，將底物工作液保存在琥珀色瓶中，并避免長期暴漏在任何強光下標準，短時間暴漏于實驗室常規(guī)照明不會損害該工作液示範推廣。
NobleRyder West Femto ECL化學發(fā)光底物
