通用型總RNA快速提取試劑盒 升級(jí)版核酸提取
采用 Trizol 試劑與離心吸附柱結(jié)合提取總RNA的方法營造一處,簡(jiǎn)化了RNA提取的流程關規定,與經(jīng)典的異丙醇沉淀法相比運行好,柱式純化方法簡(jiǎn)便的可能性,去除雜質(zhì)能力更強(qiáng)形式,大大提高了 RNA 的純度穩定發展。該試劑盒可從各種細(xì)胞或組織(動(dòng)物基石之一、植物、血液)中快速提取總 RNA增持能力,每個(gè)吸附柱每次可處理 50-100 mg 組織或5×106細(xì)胞共同努力,可同時(shí)處理大量不同樣品。通用型總RNA快速提取試劑盒 升級(jí)版核酸提取
諾博萊德 Universal Total RNA Kit通用型總 RNA 提取試劑盒
通用型總RNA快速提取試劑盒 升級(jí)版核酸提取
目錄號(hào):91013
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 91013-50 |
裂解液 RL | 50 ml |
去蛋白液 RE | 25 ml |
漂洗液 RW | 10 ml(需加入指ding量無(wú)水乙醇) |
RNase-Free ddH2O | 5 ml |
RNA 吸附柱和收集管 | 50 套 |
RNase-Free 1.5ml 離心管 | 50 支 |
RNase-Free 2.0ml 液氮研磨管 | 50 支 |
自備試劑
無(wú)水乙醇
保存條件
室溫(15 ~ 25℃)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
采用 Trizol 試劑與離心吸附柱結(jié)合提取總RNA的方法追求卓越,簡(jiǎn)化了RNA提取的流程逐漸完善,與經(jīng)典的異丙醇沉淀法相比,柱式純化方法簡(jiǎn)便合理需求,去除雜質(zhì)能力更強(qiáng)是目前主流,大大提高了 RNA 的純度。該試劑盒可從各種細(xì)胞或組織(動(dòng)物高質量、植物充分發揮、血液)中快速提取總 RNA,每個(gè)吸附柱每次可處理 50-100 mg 組織或5×106細(xì)胞管理,可同時(shí)處理大量不同樣品設計。一個(gè)小時(shí)內(nèi)即可完成反應(yīng)交流,提取的總RNA沒(méi)有DNA和蛋白的污染,可用于Northern Blot提供堅實支撐、Dot Blot還不大、PolyA 篩選、體外翻譯取得明顯成效、RNase保護(hù)分析和分子克隆約定管轄。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. RNA 純度更高;
2. 應(yīng)用廣泛:可提取多種不同的樣本材料創新的技術。
3. 本公司生產(chǎn)的 Universal Total RNA Kit 質(zhì)量?jī)?yōu)異發揮,可以wan美替代 Thermo的 TRIzol Plus RNA Purfication Kit。
4. 可在常溫下提取 RNA快速增長,不需要 4℃離心機(jī)開放以來;亦可以兼容 4℃離心機(jī)。
注意事項(xiàng)
1. RNA 在裂解液 RL 中時(shí)不會(huì)被 RNase 降解高質量,但后續(xù)處理過(guò)程中應(yīng)使用不含RNase的吸頭和玻璃器皿提供了有力支撐,璃器皿可在150℃烘烤4 h,塑料器皿可在 0.5 M NaOH 中浸泡 10 min前景,然后用水che底洗凈進一步意見,再高壓滅菌。
2. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融共享應用,否則會(huì)影響 RNA 的提取得率和質(zhì)量生產能力。
3. 樣品加入裂解液RL(RNAzol)勻漿后,加氯仿前示範推廣,樣品可在–80℃保存一個(gè)月以上堅持好。
4. 取RNA樣本時(shí),把新鮮組織樣本浸入RNAsafe(RNA 樣品保存液大幅增加,91115-100)中特性,可在 37℃保存一天,在 25℃保存一周交流研討,在 4℃保存一個(gè)月更加完善,在-20℃或者–80℃長(zhǎng)期保存形式。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)
操作步驟
第一次使用前建設應用,請(qǐng)先在漂洗液 RW 中加入指ding量無(wú)水乙醇,詳見(jiàn)瓶上的標(biāo)簽日漸深入。
提示:所有離心步驟均可在室溫(15~37℃)下進(jìn)行動力,提取效果更佳!
1. 材料處理:
a.組織(動(dòng)物互動式宣講、植物效高性、真菌):將組織在液氮中磨成細(xì)粉模式。每 30~50 mg 動(dòng)物組織加 1ml 裂解液RL,每50~100 mg植物/真菌組織加 1ml 裂解液RL互動互補,渦旋 15sec發揮重要帶動作用。樣品體積不應(yīng)超過(guò)裂解液RL體積的10%。
b.單層貼壁培養(yǎng)細(xì)胞:吸去培養(yǎng)液意料之外,加入適量裂解液RL文化價值,每 10cm2 加1ml裂解液RL,用移液器抽打幾次置之不顧。
c. 細(xì)胞懸液:離心收集細(xì)胞不斷完善,棄上清,每 5×106 個(gè)細(xì)胞加1ml裂解液RL方便。加裂解液 RL 前不要洗滌細(xì)胞基礎上,以免降解mRNA。
d.血液:取新鮮血液應用領域,加入5倍體積裂解液RL保持競爭優勢,(推薦0.2ml血液+1 ml 裂解液 RL ),充分振蕩混勻發展機遇。
2. 將勻漿樣品在室溫下放置5min不容忽視,使得核酸蛋白復(fù)合物wan全分離。
3. 可選步驟:12,000rpm 離心5min服務體系,轉(zhuǎn)移上清至一新的離心管中說服力。
(注意:如果樣品中含有較多蛋白、脂肪分析、多糖或肌肉表示、植物結(jié)節(jié)部位等可加此步驟離心去除,離心得到的沉淀中含有細(xì)胞外膜非常激烈、多糖競爭力所在、高分子DNA等,RNA 存在于上清液中)
4. 向上清(或裂解液混合液)中加入等體積的無(wú)水乙醇領域,混勻溝通機製,此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)沉淀,每次將≤750ul溶液和沉淀一起轉(zhuǎn)入RNA吸附柱中註入新的動力,12,000rpm離心1 min領先水平,倒棄濾液,若一次不能轉(zhuǎn)移wan全雙重提升,可分次轉(zhuǎn)移設計能力。
5. 向吸附柱內(nèi)加入500 ul 去蛋白液 RE,12,000 rpm 離心 1 min深入開展,倒棄濾液更為一致。
6. 向吸附柱內(nèi)加入500ul漂洗液RW等形式,12,000rpm離心1 min,棄濾液研究與應用。
(注意:請(qǐng)檢查漂洗液 RW 中是否已按要求加入無(wú)水乙醇ow躍。?
7. 重復(fù)步驟 6 一次。
8. 將RNA吸附柱放回空收集管中全面協議,12,000 rpm 離心 2min組成部分,甩干膜上殘留的乙醇。
9. 取出RNA吸附柱新的動力,放入一個(gè)新的RNase-Free 1.5ml離心管中的過程中,向吸附膜的中央部位懸空滴加50~100ul RNase-Free ddH2O,室溫放置2min廣泛關註,12,000 rpm離心1 min促進進步,管底即RNA溶液。
10. 提取的RNA可直接用于下游實(shí)驗(yàn)優勢領先,或于-70℃保存迎來新的篇章,以防降解。
相關(guān)產(chǎn)品:
71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(for PCR or qPCR)
71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase(for qPCR)
71711-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有 qPCR 儀)
通用型總RNA快速提取試劑盒 升級(jí)版核酸提取