RNAzol Plus Reagent (Trizol)核酸提取
與傳統(tǒng) Trizol 提取方法相比,RNAzol Plus 不需要使用氯仿進行分層,操作更簡單,且全程可在常溫進行。RNAzol Plus Reagent是Trizol的升級版——免氯仿,具有和Trizol類似的適用范圍擴大,可以從動物組織、培養(yǎng)細胞發揮效力、植物材料新格局、真菌、細菌及各種微生物等樣品中提取總RNA安全鏈。RNAzol Plus Reagent (Trizol)核酸提取
免氯仿總 RNA 提取試劑RNAzol Plus Reagent (NO Chloroform)
RNAzol Plus Reagent (Trizol)核酸提取
目錄號:91021
產品內容
產品成份 | 91021-100 |
RNAzol Plus Reagent | 100 ml |
自備試劑
異丙醇顯示、RNase-Free H2O、75%乙醇(使用 RNase-Free H2O 配制)
保存條件
在室溫下能穩(wěn)定保存12個月真正做到。盡管如此科普活動,為達到最佳效果,我們建議保存在2 ~ 8℃強化意識。
產品簡介
與傳統(tǒng) Trizol 提取方法相比長期間,RNAzol Plus 不需要使用氯仿進行分層,操作更簡單現場,且全程可在常溫進行高端化。
RNAzol Plus Reagent是Trizol的升級版——免氯仿,具有和Trizol類似的適用范圍我有所應,可以從動物組織提單產、培養(yǎng)細胞、植物材料能力建設、真菌關註、細菌及各種微生物等樣品中提取總RNA研究進展。
本產品提取的RNA沒有DNA和蛋白的污染無障礙,可以直接用于cDNA克隆、RT-qPCR檢測快速融入、mRNA 純化認為、體外翻譯、Northern blotting雜交增強、高通量測序等各種分子生物學實驗重要意義。
RNAzol Plus 既可用于小量樣本(50-100mg 組織、5×106細胞)的總RNA提取更加廣闊,又可用于大量樣本(≥1g組織各方面、≥107細胞)的總RNA提取。
注意事項
1) RNA在裂解液RNAzol Plus中時不會被RNase降解,但提取后繼續(xù)處理過程中應使用不含RNase的吸頭適應性,建議直接購買GeneBetter商品化的RNase-Free的吸頭堅實基礎。研缽用水che底洗凈,在150℃烘干即可重要作用。
2) 樣品應避免反復凍融等地,否則會影響RNA的提取得率和質量。
3) 樣品加入裂解液RNAzol Plus勻漿后尤為突出,樣品可在–80℃保存一個月以上規定。
4) 取RNA樣本時,把新鮮組織樣本浸入RNAsafe(RNA樣品保存液空間載體,91115-100)中高質量,可在 37℃保存一天,在25℃保存一周經驗分享,在4℃保存一個月解決方案,在-20℃或者–80℃長期保存。
具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準
操作步驟
提示:所有離心步驟均需要在室溫(15 ~37℃)下進行有力扭轉,提取效果更佳上高質量!
1. 材料處理:
a.植物組織(植物、真菌):取新鮮植物組織在液氮中充分研磨或將植物組織jian碎后在 RNAzol Plus 中研磨廣度和深度。每20-50mg組織加0.5ml裂解液RNAzol Plus深入交流,劇烈渦旋震蕩20 sec,混勻加強宣傳。
b.動物組織:取新鮮或-70℃凍存組織臺上與臺下,每15-50mg 組織加 0.5ml裂解液 RNAzol Plus,用勻漿儀進行勻漿處理技術發展〖坌?;驅⒔M織在液氮中磨碎后加入RNAzol Plus,劇烈渦旋震蕩 20 sec重要手段,混勻互動講。
c. 單層貼壁培養(yǎng)細胞:吸去培養(yǎng)液,加入適量裂解液RNAzol Plus像一棵樹,每10cm2加0.5ml 裂解液RNAzol Plus過程中,(例如:3.5cm培養(yǎng)皿加0.5ml RNAzol Plus), 用移液器反復吹打幾次,裂解細胞性能穩定。
d.細胞懸液(動物細胞全面革新、植物、酵母情況正常、細菌):離心收集細胞行業分類,棄上清技術特點,每5×106個細胞加0.5ml裂解液RNAzol Plus。加裂解液 RNAzol Plus 前不要洗滌細胞發展邏輯,以免降解 mRNA高質量。
e.血液(血液、血漿記得牢、血清):每 200 ul(低于 200 ul 時註入了新的力量,可用 RNase-free H2O 補足)血液、血漿更多可能性、血清等液體樣本去創新,加入0.5ml RNAzol Plus后,劇烈渦旋震混勻 緊迫性。
2. 加入200ul RNase-free H2O(RNAzol Plus 體積的0.4倍)結構,蓋好管蓋,劇烈振蕩混勻高效,室溫放置5min溝通協調。
3. 室溫12,000rpm離心15min,樣品將分為二層體系,下層沉淀和上層水相保障性,RNA主要在上層水相(約630 ul)中,轉移500 ul水相到一新的離心管中責任製。
注意:提取微量樣本時十分落實,如果不出現分層,則轉移全部上清規則製定。
4. 在得到的水相溶液中加入等體積的異丙醇製造業,顛倒混勻,室溫放置 10 min關規定。
5. 室溫 12,000 rpm 離心 10 min發展基礎,通常可以看到白色沉淀建強保護,棄上清積極。
(離心前 RNA 沉淀通常是看不見的,離心后在管側或管底成薄片狀沉淀進一步完善。)
6. 加入1ml 75%乙醇洗滌沉淀集聚,渦旋震蕩15sec,讓沉淀懸浮起來競爭力,并上下顛倒數次調整推進。
7. 室溫 12,000 rpm 離心3分鐘,倒出上清機製性梗阻,注意不要倒出沉淀機製,剩余的少量液體短暫離心全過程,然后用槍頭吸出,注意不要吸棄沉淀探討。
8. 可選步驟:重復步驟6和7一次不負眾望,可增加純度。
9. 室溫放置約1分鐘調解製度,晾干精準調控。加入50~100 ul的RNase-Free ddH2O,吹打混勻應用的因素之一,充分溶解RNA解決。
10. 得到的RNA,可立即用于下游實驗敢於監督,或于-70℃保存幅度,防止降解。
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