動物組織/細(xì)胞/昆蟲總RNA快速提取試劑盒
適用于快速提取各種動物組織支撐作用、細(xì)胞、昆蟲的總RNA深化涉外，gDNA過濾器高效濾除gDNA體系，RNA可直接用于RT，RT-PCR開展試點，RT-qPCR攜手共進，普通轉(zhuǎn)錄組測序、RACE 等推進一步。動物組織/細(xì)胞/昆蟲總RNA快速提取試劑盒
FlashPure Plus Tissue/Cell/Insect Total RNA Mini Kit 動物組織/細(xì)胞/昆蟲總 RNA 提取試劑盒（帶 gDNA 過濾器）
動物組織/細(xì)胞/昆蟲總RNA快速提取試劑盒
目錄號：91218
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 91218-50（50 次） |
裂解液 ARL Plus | 30 ml |
去蛋白液 RW1 | 40 ml |
漂洗液 RW | 10 ml（需加入指ding量無水乙醇） |
70%乙醇 | 9 ml（需加入指ding量無水乙醇） |
RNase-Free H2O | 10 ml |
gDNA 過濾器和收集管 | 50 套 |
RNA 吸附柱和收集管 | 50 套 |
RNase-Free 1.5 ml 離心管 | 50 支 |
RNase-Free 2.0 ml 液氮研磨管 | 50 支 |
自備試劑
無水乙醇
保存條件
室溫（15~25℃）經過，有效期 12 個月。
產(chǎn)品簡介
適用于快速提取各種動物組織力度、細(xì)胞明確了方向、昆蟲的總RNA，gDNA過濾器高效濾除gDNA善謀新篇，RNA可直接用于RT增產，RT-PCR便利性，RT-qPCR方法，普通轉(zhuǎn)錄組測序、RACE 等提供有力支撐。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 無毒：免氯仿切實把製度、免β-巰基乙醇！
2. 高質(zhì)：28s/18s=2:1自行開發，OD260/280=2.0～2.2進行部署！
3. 高效：提取全過程僅需 10 min責任！
重要提示：
① 第一次使用前，請先在漂洗液RW中加入無水乙醇示範，詳見標(biāo)簽應用前景。
② 所有離心步驟均需要在室溫（15~37℃）下進(jìn)行。
③ 高豐度樣本（肝臟運行好、脾臟首次、腎臟、胰腺部署安排、心臟）的投入量減半搖籃。
操作步驟：
1. 動物組織、昆蟲：
a．電動勻漿：取新鮮組織 10~20 mg 加入 350μl的裂解液ARL Plus推廣開來，電動勻漿推動，直到無明顯組織塊即可。
b．液氮研磨：在液氮中研磨組織成細(xì)粉資源配置，取10~20 mg組織細(xì)粉加入350μl裂解液ARL Plus信息，劇烈渦旋振蕩20sec，充分裂解大力發展。
注意：裂解 20~30 mg 組織首要任務，需要加入 600 μl 裂解液 ARL Plus。
c． 將勻漿后裂解物13不同需求，000 rpm 離心3min發展。
d．下接步驟 3。
2. 細(xì)胞
a．懸浮細(xì)胞：收集<107懸浮細(xì)胞到一個 1.5ml 離心管總之；
貼壁細(xì)胞（培養(yǎng)皿培養(yǎng)）：wan全吸棄培養(yǎng)基后面向，直接在培養(yǎng)皿中加入裂解液ARL Plus進(jìn)行消化、裂解研學體驗；
貼壁細(xì)胞（細(xì)胞瓶培養(yǎng)）：應(yīng)該先用胰蛋白mei消化后吹打下來收集建設項目。
b．13,000rpm 離心10sec，wan全吸棄上清落實落細，留下細(xì)胞團(tuán)相結合。
c．輕彈管底使細(xì)胞松散，然后加入350μl（<5x106 細(xì)胞）或600μl（5x106-1x107細(xì)胞）裂解液ARL Plus製高點項目，渦旋振蕩為產業發展，充分混勻。
d．下接步驟 3有所增加。
貼壁細(xì)胞培養(yǎng)數(shù)量表：（細(xì)胞數(shù)量＞1x107各項要求，請酌情增加裂解液的用量）
培養(yǎng)器皿 | 面積（cm2） | 培養(yǎng)液量 （ml） | 細(xì)胞數(shù)量 |
96 孔培養(yǎng)板 | 0.32 | 0.1 | 105 |
24 孔培養(yǎng)板 | 2 | 1.0 | 5×105 |
12 孔培養(yǎng)板 6 孔培養(yǎng)板 3.5cm 培養(yǎng)皿 | 4.5 9.6 8 | 2.0 2.5 3.0 | 106 2.5×106 2×106 |
6cm 培養(yǎng)皿 | 21 | 5.0 | 5.2×106 |
9cm 培養(yǎng)皿 | 49 | 10.0 | 1.22×107 |
25cm 培養(yǎng)瓶 75cm 培養(yǎng)瓶 100cm 玻璃培養(yǎng)瓶 | 25 75 33 | 5.0 15～30 10 | 5×106 2×107 7x 106 |
3. 將裂解物上清或者裂解物全部加到gDNA 過濾器上（過濾器放在收集管內(nèi)），立刻 13,000 rpm 離心1 min估算，保留濾液（RNA 在濾液中）講理論。
4. 向?yàn)V液中加入等體積（350μl/600μl）的70%乙醇的可能性，吹打混勻。
5. 每次吸取≤750μl濾液混合物轉(zhuǎn)入一個RNA吸附柱中（吸附柱放入收集管中）服務為一體，13,000 rpm離心1min問題，倒棄濾液。此時(shí)全會精神，RNA被吸附在膜上緊密相關，重復(fù)此過程，直到溶液全部上柱先進技術。
6. 加入700μl去蛋白液 RW1,室溫放置 1min,13,000 rpm 離心30sec培訓，倒棄濾液。
7. 加入500μl漂洗液 RW宣講手段，13,000 rpm 離心30sec重要工具，倒棄濾液。
8. 重復(fù)步驟7配套設備。
9. 把RNA吸附柱放回收集管中更優質，13,000rpm 離心2min，che底除去膜上的乙醇推進高水平。
10. 取出RNA吸附柱脫穎而出，放入一個RNase-free 1.5ml離心管中，向吸附膜的中央部位懸空滴加30-50μl RNase-Free H2O生產創效，室溫放置1min結構，13,000rpm離心1min。
11. 得到的RNA優化上下，可直接用于下游實(shí)驗(yàn)能力建設，或于-70℃保存，以免降解生產體系。
附錄：
一服務、免液氮直接研磨（自動研磨儀）——適用于新鮮樣本
a. 在2.0ml 液氮研磨管中加入4mm兩粒，加600μl裂解液ARL plus能力和水平，放進(jìn)20mg左右的樣本覆蓋，設(shè)置65個頻率，震蕩2min研究。
b. 將裂解物13,000rpm離心3min流動性，沉淀不能裂解的碎片。
二行業內卷、液氮研磨（自動研磨儀）:
a. 把研磨模塊丟到液氮中預(yù)冷追求卓越，直到?jīng)]有氣泡冒出視為預(yù)冷完畢逐漸完善。
b. 在2.0ml液氮研磨管中放入3mm鋼珠3粒參與能力，放進(jìn)20-30mg 樣本合理需求，投入液氮中預(yù)冷。
c. 把預(yù)冷好的離心管插入研磨模塊中充分發揮，放進(jìn)研磨儀高質量，設(shè)置 55 個頻率，震蕩30~60sec選擇適用。（以北京赫得研磨儀——京 N9548 為例）
d. 研磨完成后管理，馬上加600μl裂解液ARL Plus，劇烈渦旋振蕩,充分混勻業務指導。
e. 將裂解物13,000rpm離心3min改進措施，沉淀不能裂解的碎片。
相關(guān)產(chǎn)品：
71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）
71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）
71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有qPCR儀)
動物組織/細(xì)胞/昆蟲總RNA快速提取試劑盒
