超速全血(液體樣本)總RNA提取試劑盒
采用 RNAzol LS Reagent與吸附柱相結(jié)合提取總RNA的方法措施,簡(jiǎn)化了RNA 提取的流程,與經(jīng)典的異丙醇沉淀法相比發揮作用,柱式純化方法簡(jiǎn)便良好,去除雜質(zhì)能力更強(qiáng),大大提高了RNA的純度銘記囑托。超速全血(液體樣本)總RNA提取試劑盒
超速血液總 RNA 提取試劑盒
FlashPure Blood Total RNA Kit
超速全血(液體樣本)總RNA提取試劑盒
目錄號(hào):91213
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 91213-50(50 次) |
裂解液 RLS | 50 ml |
去蛋白液 RE | 25 ml |
漂洗液 RW | 10 ml(需加入指ding量無水乙醇) |
70%乙醇 | 9 ml(需加入指ding量無水乙醇) |
RNase-Free ddH2O | 10 ml |
RNA 吸附柱和收集管 | 50 套 |
RNase-Free 1.5ml 離心管 | 50 支 |
自備試劑
無水乙醇
保存條件
室溫(15 ~ 25℃)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
采用 RNAzol LS Reagent與吸附柱相結(jié)合提取總RNA的方法引領,簡(jiǎn)化了RNA 提取的流程,與經(jīng)典的異丙醇沉淀法相比示範,柱式純化方法簡(jiǎn)便應用前景,去除雜質(zhì)能力更強(qiáng),大大提高了RNA的純度運行好。該試劑盒可從各種血液首次、血漿、血清中快速提取總RNA部署安排,每個(gè)吸附柱每次可處理0.25ml液體樣本或5~10×106細(xì)胞搖籃。提取的總RNA沒有DNA和蛋白的污染,可用于Northern Blot、Dot Blot標準、PolyA 篩選示範推廣、體外翻譯、RNase 保護(hù)分析和分子克隆即將展開。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. RNA 純度更高大幅增加;
2. 應(yīng)用廣泛:可提取多種不同的樣本材料。
注意事項(xiàng)
1. 血液 RNA 的常溫保存/運(yùn)輸/提取的簡(jiǎn)易方案:
臨床取樣:在臨床上傳承,使用抗凝管采血后等特點,取250μl新鮮血液,加入 750μl的裂解液RLS(RNAzol LS Reagent多種,Cat#91012-100)建設應用,用移液槍反復(fù)抽打并振蕩混勻,在室溫裂解5~10min日漸深入,直至血細(xì)胞充分發(fā)生裂解。
保存:經(jīng)裂解后的血液可在-20℃下保存 1-2 個(gè)月同時,在-70℃保存半年互動式宣講。
運(yùn)輸:可冰袋 4℃運(yùn)輸 1 天,干冰-20℃運(yùn)輸一周模式。
提茸詣踊?。?/span>后續(xù) RNA 提取按 R213(或 R012)的說明書進(jìn)行。
2. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融高品質,否則會(huì)影響 RNA 的提取得率和質(zhì)量不折不扣。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)
操作步驟(所有離心步驟均可在室溫下進(jìn)行,不影響提取效果YY源優勢。?/span>
操作前高效利用,請(qǐng)先在漂洗液 RW、70%乙醇中加入無水乙醇估算,詳見瓶身的標(biāo)簽講理論。
1. 每250μl液體樣品 (血清、血漿不要畏懼、腦脊液服務為一體、凍存血等),加入 750 μl裂解液 RLS逐漸顯現,用移液器反復(fù)抽打幾次進行培訓,然后劇烈渦旋震蕩,充分混勻長效機製。
(液體樣品和裂解液 RLS 的終體積比總是 1:3)
2. 將勻漿樣品在室溫下放置 5 min法治力量,使得核酸蛋白復(fù)合物wan全分離。
3. 加入 200μl 氯仿,劇烈振蕩 15 秒搶抓機遇,并在室溫下放置 2-3 分鐘分析。
4. 12,000 rpm 離心 10 min。樣品會(huì)分成三層:下層有機(jī)相全面闡釋,中間層和上層無色的水相非常激烈,RNA 存在于水相中。水相層的容量大約為所加 RLS體積的 70%引人註目,轉(zhuǎn)移上清至一個(gè)新的離心管中領域,進(jìn)行下一步操作。
5. 向上清中加入等體積 70%乙醇(檢查是否已加入乙醇)好宣講,顛倒混勻註入新的動力。
6. 每次轉(zhuǎn)移≤750 μl 上清混合液(包括沉淀)至 RNA 吸附柱中,12,000rpm 離心 1 min,倒棄濾液雙重提升。重復(fù)此過程,直到溶液全部上柱事關全面。
7. 加入 500μl 去蛋白液 RE表現明顯更佳,12,000 rpm 離心 1 min,倒棄濾液技術節能。
8. 加入 500 μl 漂洗液 RW指導,12,000 rpm 離心 1 min,倒棄濾液國際要求。
(注意:漂洗液 RW 中按要求加入無水乙醇流動性,用后立即蓋緊瓶蓋,以防乙醇揮發(fā))
9. 可選步驟:重復(fù)步驟 8 一次競爭激烈。
10. 將RNA吸附柱放回空收集管中持續創新,12,000 rpm 離心2min,去除乙醇空白區。
11. 取出RNA吸附柱合理需求,放入一個(gè)新的 RNase-Free 1.5 ml 離心管中,向吸附膜的中央加入 30~50 μl 的RNase-Free ddH2O促進進步,室溫放置 2 min發力,12,000 rpm 離心 1 min。
(注意:如要要提高 RNA 濃度迎來新的篇章,可將得到的溶液重新加到吸附柱中共創美好,室溫放置2 min,再次離心收集)
12. 提取的 RNA薄弱點,可直接用于下游實(shí)驗(yàn)覆蓋範圍,或于-70℃保存優化程度,以免降解。
相關(guān)產(chǎn)品:
71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(for PCR or qPCR)
71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase(for qPCR)
71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有qPCR儀)
超速全血(液體樣本)總RNA提取試劑盒