細(xì)菌總RNA提取試劑盒 核酸提取
FlashPure Bacteria Total RNA Mini Kit 是專用于提取細(xì)菌(G+高質量、G-)的總 RNA,全新的裂解液沒(méi)有任何味道服務好,提取過(guò)程也不需要使用氯仿和諧共生,提取的產(chǎn)量和純度媲美進(jìn)口一線品pai。細(xì)菌總RNA提取試劑盒 核酸提取
FlashPure Bacteria Total RNA Mini Kit
細(xì)菌總 RNA 快速提取試劑盒(免lv仿)
細(xì)菌總RNA提取試劑盒 核酸提取
目錄號(hào):91018
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 91018-50(50 次) |
溶菌mei | 20 mg |
TE (PH 8.0) | 6 ml |
裂解液 BRL | 25 ml |
去蛋白液 RW1 | 40 ml |
漂洗液 RW | 10 ml(需加入指ding量無(wú)水乙醇) |
RNase-Free ddH2O | 5 ml |
RNA 吸附柱和收集管 | 50 套 |
RNase-Free 1.5ml 離心管 | 50 支 |
RNase-Free 2.0ml 液氮研磨管 | 50 支 |
自備試劑
無(wú)水乙醇
保存條件
溶菌mei積極,常溫運(yùn)輸探索, 4℃保存;其他組分集聚,室溫(15 ~ 25℃)保存競爭力。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
FlashPure Bacteria Total RNA Mini Kit 是專用于提取細(xì)菌(G+、G-)的總 RNA狀況,全新的裂解液沒(méi)有任何味道機製性梗阻,提取過(guò)程也不需要使用氯仿,提取的產(chǎn)量和純度媲美進(jìn)口一線品pai全過程。得到的 RNA集成應用,可直接用于 RT、RT-PCR不負眾望、RT-qPCR高效流通、RACE、全轉(zhuǎn)錄組測(cè)序精準調控、芯片等功能。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 無(wú)毒:免lv仿、免β-巰基乙chun解決!
2. 高質(zhì):28s/18s=2:1預期,OD260/280=2.0~2.2!
3. 高效:提取全過(guò)程僅需 10 min!
注意事項(xiàng)
1. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融結構,否則會(huì)影響 RNA 的提取得率和質(zhì)量重要的作用。
2. 樣品加入裂解液 BRL Plus 勻漿后,樣品可在–80℃保存一個(gè)月以上規模最大。
3. 提取過(guò)程應(yīng)使用不含 RNase 的吸頭和器皿穩中求進。
重要提示:
① 第一次使用前,請(qǐng)先在漂洗液 RW 中加入無(wú)水乙醇系統性,詳見(jiàn)瓶身的標(biāo)簽勇探新路。
② 每次操作前,請(qǐng)先配制添加了溶菌mei或者 Lysostaphin 的 TE (PH 8.0)傳遞,終濃度為 1mg/ml方法。
③ 所有離心步驟均需要在室溫(15~25℃)下進(jìn)行。
操作步驟:
1. 離心收集 1~2 ml 菌液(108~109細(xì)胞)到一個(gè) 1.5 ml 離心管, 盡可能che底吸棄上清提供有力支撐。
2. 根據(jù)細(xì)胞的種類和數(shù)量切實把製度,充分重懸細(xì)胞在 100 μl ( 5x108細(xì)胞 ) / 200 μl( 5x108~7.5x108細(xì)胞 ) TE 中(確保已添加溶菌mei或者 Lysostaphin 至TE 中,濃度為 1mg/ml )自行開發,或者直接用 TE 重懸后進行部署,用干凈槍頭挑取少許溶菌mei加入。
3. 室溫(15~25℃)溫育5min/溶菌mei, 或者37℃溫育15min / Lysostaphin應用情況,破解細(xì)胞壁保護好。每 2 min 渦旋振蕩 10 sec,幫助破壁表現。
注意:各種細(xì)菌破壁的難易程度不一樣特點,一般革蘭氏陰性菌 E.coli 使用上面的條件就足夠了,甚至可能省略該步驟結論,但是某些革蘭氏陽(yáng)性菌如B. subtilis 難破壁需要提高溶菌mei濃度到 15mg/ml 和溫育時(shí)間到10min和諧共生。如果金黃色葡萄球jun需要加入 lysostaphin 到 1mg/ml,37℃溫育 15min適應性強〖夹g交流?傊煌?xì)菌類型破壁難易程度不同,有的難破壁的種類
需要根據(jù)用戶自己的具體情況調(diào)節(jié)酶的種類拓展、工作濃度和溫育溫度創造更多、時(shí)間,此外還可以聯(lián)合使用玻璃珠擊打不斷進步,機(jī)械破壁工藝技術,蛋白酶 K 消化等方法幫助破壁。
4. 加入350μl裂解液 BRL( 如果上面使用 100 μl TE/酶 )或者700μl裂解液 BRL(如果上面使用 200 μl TE/酶)規模,吹打混勻后近年來,用手劇烈振蕩20 秒講故事,充分裂解。
5. 加入 250 μl 無(wú)水乙醇(曾加入 100 μl TE / 350 μl BRL 管)或者 500 μl無(wú)水乙醇(曾加入200μl TE / 700μl BRL 管)性能穩定,立即吹打混勻。
6. 每次轉(zhuǎn)移≤750 μl 濾液混合液至 RNA 吸附柱中(吸附柱放入收集管中)支撐作用,13,000 rpm 離心 1 min研學體驗,倒棄濾液。此時(shí)最為突出,RNA 被吸附在膜上落實落細,重復(fù)此過(guò)程,直到溶液全部上柱高效化。
7. 加入 700 μl 去蛋白液 RW1製高點項目,室溫放置 1min,13,000 rpm 離心 30 sec範圍和領域,倒棄濾液有所增加。
8. 加入 500 μl 漂洗液 RW,13,000 rpm 離心 30 sec更高要求,倒棄濾液越來越重要的位置。
9. 重復(fù)步驟 8 一次。
10. 將 RNA 吸附柱放回空收集管中共同學習,13,000 rpm 離心 2 min順滑地配合,除去乙醇。
11. 取出 RNA 吸附柱效高,放入一個(gè)新的 RNase-free 1.5 ml 離心管中前沿技術,向 RNA吸附膜的中央懸空滴加 30-50 μl RNase-free H2O,室溫放置 1 min性能,13,000 rpm 離心 1 min多種方式。
12. 得到的 RNA,可直接用于下游實(shí)驗(yàn)技術創新,或于-70℃保存邁出了重要的一步,以免降解。
相關(guān)產(chǎn)品:
71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(for PCR or qPCR)
71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase(for qPCR)
71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有 qPCR 儀)
細(xì)菌總RNA提取試劑盒 核酸提取