骨組織總RNA快速提取試劑盒(帶gDNA過濾器)
本產(chǎn)品適用于快速提取骨組織細(xì)胞的總 RNA,利用多年研制而成的骨組織專用裂解液等形式,并添加多種成分去除骨組織蛋白多糖推進高水平,采用高效的 gDNA 過濾器開展攻關合作,不需要繁瑣的 DNase I消化重要意義,提取的 RNA,可直接用于 RT研學體驗、RT-PCR建設項目、RACE、RT-qPCR落實落細、普通轉(zhuǎn)錄組測(cè)序相結合、芯片等。骨組織總RNA快速提取試劑盒(帶gDNA過濾器)
FlashPure Bone Total RNA Mini Kit
骨組織 RNA 快速提取試劑盒(帶 gDNA 過濾器)
骨組織總RNA快速提取試劑盒(帶gDNA過濾器)
目錄號(hào):91514
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 91514-50(50 次) |
裂解液 FSL | 50 ml |
Boneaid | 5 ml |
裂解液 PRL Plus | 25 ml |
去蛋白液 RW1 | 40 ml |
漂洗液 RW | 10 ml(需加入指ding量無水乙醇) |
RNase-Free H2O | 5 ml |
gDNA 過濾器和收集管 | 50 套 |
RNA 吸附柱和收集管 | 50 套 |
RNase-Free 1.5ml 離心管 | 50 支 |
RNase-Free 2.0 ml 液氮研磨管 | 50 支 |
自備試劑
無水乙醇
保存條件
室溫(15~25℃)製高點項目,有效期 12 個(gè)月為產業發展。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
骨組織堅(jiān)硬、骨細(xì)胞密度低、而且外周基質(zhì)含有大量黏蛋白(蛋白多糖)和RNA難以分離高效利用,無法用傳統(tǒng)Trizol法進(jìn)行高質(zhì)量提取特征更加明顯。
本產(chǎn)品適用于快速提取骨組織細(xì)胞的總RNA,利用多年研制而成的骨組織專用裂解液講實踐,并添加多種成分去除骨組織蛋白多糖數字技術,采用高效的gDNA過濾器,不需要繁瑣的DNase I消化市場開拓,提取的RNA,可直接用于RT大大縮短、RT-PCR要落實好、RACE、RT-qPCR更默契了、普通轉(zhuǎn)錄組測(cè)序先進技術、芯片等。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 高質(zhì):28s/18s=2:1不合理波動,OD260/280=2.0~2.2宣講手段!
2. 高效:提取全過程僅需 30min!
注意事項(xiàng)
1. 如果 FSL 有析出或者沉淀積極拓展新的領域,請(qǐng)將其置于 65℃水浴中配套設備,重新溶解后使用。
2. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融相對開放,否則會(huì)影響 RNA 的提取得率和質(zhì)量推進高水平。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)
操作步驟:
提示:
① 第一次使用前請(qǐng)先在漂洗液RW中加入無水乙醇,加入量詳見瓶身標(biāo)簽拓展應用。
② 操作前生產創效,取1ml裂解液FSL至2.0ml離心管內(nèi),加入10%的Boneaid管理,
(例如:1ml FSL 加100μl Boneaid)優化上下,顛倒混勻后,65℃水浴中預(yù)熱模樣。
多個(gè)樣本按比例放大生產體系。
③ 所有離心步驟均需要在室溫(15℃~25℃)下進(jìn)行。
1. 液氮研磨法:
a.用骨qian夾碎骨組織提供了遵循,放入研缽(研缽在 180 度干烤 2 小時(shí))規模,在液氮中反復(fù)研磨成細(xì)粉。
注意:研磨時(shí)基石之一,要不斷補(bǔ)加液氮聯動,保證樣本的研磨在液氮中進(jìn)行。
b.轉(zhuǎn)移 100 mg 細(xì)粉至 65℃預(yù)熱的裂解液 FSL(已加有 Boneaid)中,立即劇烈渦旋震蕩 30 Sec行業內卷,充分混勻追求卓越。
c.下接步驟 3。
2. 其它骨組織破碎方法:
a. 取100mg骨組織加入1 ml預(yù)熱的裂解液FSL(已加有 Boneaid)參與能力, 高速均質(zhì)儀粉碎勻漿合理需求。或者取 100 mg 液氮冷凍包埋切片粉碎的骨頭加入 1 ml 裂解液 FSL(已加有 Boneaid)粉碎勻漿充分發揮。
b. 下接步驟 3高質量。
3. 短暫回放至 65℃水浴 10 min,中間偶爾顛倒 1~2 次選擇適用,幫助裂解管理。
4. 將裂解物 13,000 rpm 離心 5 ~10 min,沉淀不能裂解的碎片業務指導。
5. 轉(zhuǎn)移上清至一個(gè)新的 2.0 ml 離心管中改進措施,加入 0.5 倍上清體積的無水乙醇,吹打混勻長足發展。
6. 每次轉(zhuǎn)移≤750 μl 上清混合液至 gDNA 過濾器中(過濾器放入收集管)今年,13,000 rpm 離心 2 min,倒棄濾液結構不合理。此時(shí)動手能力,絕大部分 gDNA 被濾除,RNA 和少量 gDNA 殘留被吸附在膜上銘記囑托,重復(fù)此過程引領,直到混合液全部轉(zhuǎn)入 gDNA 過濾器。
7. 取出步驟 6 的 gDNA 過濾器示範,放入一個(gè)新的 2.0 ml 離心管中應用前景,加入500 μl 裂解液 PRL Plus,13,000 rpm 離心 1 min運行好,收集濾液(RNA 在濾液中)首次,向?yàn)V液中加入 250μl 無水乙醇,吹打混勻進一步意見。
8. 將濾液混合物加入 RNA 吸附柱中增幅最大,13,000 rpm 離心 2 min,倒棄濾液生產能力。此時(shí)標準,RNA 被吸附在膜上。
9. 加入 700 μl 去蛋白液 RW1堅持好,室溫放置 1min即將展開,13,000 rpm 離心 30 sec大幅增加,倒棄濾液。
10. 加入 500 μl 漂洗液 RW傳承,13,000 rpm 離心 30 sec等特點,倒棄濾液。
11. 重復(fù)步驟 10 一次多種。
12. 將 RNA 吸附柱放回空收集管中將進一步,13,000 rpm 離心 2 min,除去膜上殘留的乙醇發展成就。
13. 取出 RNA 吸附柱成就,放入 RNase-free1.5 ml 離心管中,向 RNA 吸附膜的中央懸空滴加 30~50 μl 的 RNase-free H2O互動式宣講,室溫放置 1 min效高性,13,000 rpm 離心 1 min。
14. 提取的總RNA自動化,可直接用于下游實(shí)驗(yàn),或于-70℃保存高品質,以免降解不折不扣。
相關(guān)產(chǎn)品:
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