動(dòng)物組織/細(xì)胞RNA共提試劑盒 核酸提取
Tissue/Cell RNA/ miRNA /DNA Mini Kit（免氯仿）適用于從各種動(dòng)物組織自行開發、細(xì)胞中同時(shí)提取出RNA/miRNA（包含miRNA的總RNA）節點、基因組DNA技術的開發，提取全程不需要使用氯仿發揮效力，得到包含miRNA的總RNA不可缺少，不需要DNase I消化有所應，可直接用于miRNA和mRNA的RT足了準備、RT-PCR、RT-qPCR著力提升、RACE深刻內涵、芯片、測(cè)序等融合。動(dòng)物組織/細(xì)胞RNA共提試劑盒 核酸提取
Tissue/Cell RNA/ miRNA /DNA Mini Kit
動(dòng)物組織/細(xì)胞 RNA/ miRNA/DNA 共提試劑盒
動(dòng)物組織/細(xì)胞RNA共提試劑盒 核酸提取
目錄號(hào)：91418
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 91418-50（50 次） |
裂解液 MRL Plus | 50 ml |
Wash Solution 1 | 12 ml（需加入指ding量無水乙醇） |
Wash Solution 2/3 | 10 ml（需加入指ding量無水乙醇） |
RNase-Free ddH2O | 5 ml |
抑制物去除液 IR | 25 ml |
漂洗液 WB | 13 ml（需加入指ding量無水乙醇） |
洗脫緩沖液 EB | 10 ml |
gDNA 吸附柱和收集管 | 50 套 |
RNA 吸附柱和收集管 | 50 套 |
RNase-Free 1.5ml 離心管 | 50 支 |
RNase-Free 2.0ml 液氮研磨管 | 50 支 |
自備試劑
無水乙醇
保存條件
室溫（15 ~ 25℃）
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Tissue/Cell RNA/ miRNA /DNA Mini Kit（免氯仿）適用于從各種動(dòng)物組織深入闡釋、細(xì)胞中同時(shí)提取出RNA/miRNA（包含miRNA的總RNA）、基因組DNA完成的事情，提取全程不需要使用氯仿物聯與互聯，得到包含miRNA的總RNA，不需要DNase I消化改造層面，可直接用于miRNA和mRNA的RT供給、RT-PCR優勢與挑戰、RT-qPCR、RACE投入力度、芯片創造、測(cè)序等∫幎?；蚪M DNA 也可以直接用于下游的 Southern環境、酶切、PCR等各種試驗(yàn)高質量。
du特的裂解液迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞 RNase/DNase相對簡便，然后裂解混合物 RNA/miRNA/ DNA 同時(shí)通過一個(gè) gDNA 吸附柱，基因組 DNA 被吸附而 miRNA/RNA 穿透濾過流程。gDNA 吸附柱上的基因組 DNA 經(jīng)過一系列漂洗合作、洗脫后得到純凈基因組 DNA。濾過的 RNA/miRNA助力各業，先用乙醇調(diào)節(jié)結(jié)合條件極致用戶體驗，然后轉(zhuǎn)入 RNA 吸附柱，在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于 RNA 吸附柱上應用，接著通過一系列快速的離心-漂洗-離心-洗脫建議，得到純凈的 RNA/miRNA（包含 miRNA 的總 RNA）。
注意事項(xiàng)
1. 采集 RNA 樣本時(shí)相貫通，把新鮮組織樣本浸入 RNAsafe (RNA 樣品保存液不斷發展，91115-100) 中，可在 37℃保存一天自動化方案，在 25℃保存一周緊密協作，在 4℃保存一個(gè)月，在-20℃或者–80℃長(zhǎng)期保存線上線下。
2. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融發揮重要作用，否則會(huì)影響RNA的提取得率和質(zhì)量。
3. 提取時(shí)過程中，RNA在裂解液MRL Plus中時(shí)不會(huì)被RNase降解去突破，但后續(xù)處理過程中應(yīng)使用不含RNase的吸頭和器皿。
4. 樣品在加入裂解液 MRL Plus 并勻漿后達到，可在–80℃保存一個(gè)月以上智能設備。
5. Wash Solution 2/3 可能加入乙醇使用幾天后，可能會(huì)出現(xiàn)沉淀晶體蓬勃發展，并不影響使用特點，取其上清直接使用就可以。
重要提示：
① 第一次使用前, 請(qǐng)先在 Wash Solution 1重要性、Wash Solution 2/3凝聚力量、漂洗液 WB 中加入指ding量無水乙醇有所提升，詳見瓶上的標(biāo)簽。
② 所有離心步驟均需要在室溫（15~25℃）下進(jìn)行新的力量，提取效果更佳先進水平！
操作步驟
1. 動(dòng)物組織：
a．電動(dòng)勻漿：取新鮮組織10~20mg加入500μl裂解液MRL Plus，電動(dòng)勻漿全面展示，直到無明顯組織塊即可重要平臺。
b．液氮研磨：液氮研磨組織成細(xì)粉，取10~20mg組織細(xì)粉加入500μl裂解液MRL Plus核心技術，劇烈渦旋振蕩應用提升，直到無明顯粉末團(tuán)即可。
c． 將裂解物 13,000 rpm 離心 3 min創造性，沉淀不能裂解的碎片發展的關鍵。
d．下接操作步驟 3。
2. 細(xì)胞
a. 懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞規模設備，加500μl裂解液MRL Plus（<8x106細(xì)胞）, 吹打混勻真諦所在，劇烈渦旋振蕩20sec，充分裂解競爭力。
b. 貼壁細(xì)胞：不需要消化倍增效應，吸棄培養(yǎng)基后，直接在培養(yǎng)皿中加裂解液MRL Plus（每<8x106細(xì)胞加500μl裂解液MRL Plus）進(jìn)行消化製造業、裂解；或者關規定，先用胰mei消化后離心收集細(xì)胞發展基礎，然后加入裂解液MRL Plus，吹打混勻建強保護，劇烈渦旋振蕩20sec同期，充分裂解。
c. 下接操作步驟 3使命責任。
3. 將裂解勻漿物（或離心得到的上清）全部加入gDNA吸附柱中（吸附柱放入收集管中）效果，13,000 rpm 離心 1 min，基因組 DNA 被吸附在膜上合規意識，保留濾液（RNA/ miRNA/Protein 在濾液中）密度增加。
把gDNA吸附柱放入2.0ml離心管，置于4℃度創新內容，以備提取DNA用構建。
以下是 RNA/miRNA 的提取步驟：（包含 miRNA 的總 RNA）
4. 向?yàn)V液中加入 1.25 倍體積的無水乙醇，用移液器吹打混勻服務延伸。
5. 每次轉(zhuǎn)移≤750 μl濾液混合物至RNA吸附柱中共創輝煌，13,000 rpm離心1min具有重要意義，此時(shí)，RNA 被吸附在膜上大部分，保留濾液強大的功能，以備提取 Protein。
濾液中含有Protein解決方案，請(qǐng)轉(zhuǎn)入一個(gè)合適大袃瀯?。ㄖ辽?倍濾液體積）的離心管，用于步驟 18開始的 Protein 提取幅度。
6. 加入700μl Wash Solution 1（檢查是否已加入乙醇）結構，室溫放置1 min, 13,000 rpm 離心30sec，倒棄濾液貢獻。
7. 加入500μl Wash Solution 2/3（檢查是否已加入乙醇）規模最大，13,000 rpm離心30sec，倒棄濾液統籌。
8. 重復(fù)步驟 7最深厚的底氣。
9. 將RNA吸附柱放回空收集管中，13,000 rpm離心2min振奮起來，除去膜上殘留的乙醇品質。
10. 取出RNA吸附柱，放入RNase-free 1.5ml離心管中深入各系統，向RNA吸附膜的中央部位懸空滴加30~50μl的RNase-free H2O解決問題，室溫放置1min， 13,000rpm離心1min作用，管底即包含miRNA 的總RNA相互配合。
11. 得到RNA/miRNA，可直接用于下游實(shí)驗(yàn)著力增加，或于-70℃保存智能化，以免降解。
以下步驟為提取 DNA 步驟：
12. 向步驟3的gDNA吸附柱中處理，加入500μl抑制物去除液IR建設，12,000 rpm離心30 sec，倒棄濾液開展研究。
13. 加700μl漂洗液WB（檢查是否已加入乙醇）姿勢，12,000 rpm離心30sec，倒棄濾液首要任務。
14. 加入500 μl漂洗液 WB適應性強，12,000rpm離心30 sec，倒棄濾液。
15. 將DNA吸附柱放回空收集管中拓展，13,000rpm 離心2 min創造更多，盡量除去漂洗液，以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應(yīng)不斷進步。
16. 取出gDNA 吸附柱工藝技術，放入新的1.5 ml的離心管中，向吸附膜的中央懸空滴加 100 μl 洗脫緩沖液 EB（洗脫緩沖液事先在 65~70℃水浴中預(yù)熱效果更好）規模，室溫放置 3~5 min近年來，12,000 rpm離心1 min。將得到的溶液重新加入離心吸附柱中發展目標奮鬥，室溫放置 2 min技術先進，12,000 rpm離心1min。
17. 得到的DNA可以存放在2~8℃延伸，如果要長(zhǎng)時(shí)間存放認為，可以放置在- 20℃。
與 RNA 相關(guān)的產(chǎn)品：
71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）
71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）
71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有qPCR儀)
與 miRNA 相關(guān)的產(chǎn)品：
71418-25 Script III miRNA 1st Stand Synthesis Kit（加尾法）
71419-500 Script III miRNA Real-Time PCR Assay kit（for qPCR新趨勢，加尾法）
71613-500 Script III miRNA RT-qPCR Detection kit（71418-25 + 71419-500）
動(dòng)物組織/細(xì)胞RNA共提試劑盒 核酸提取
